狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒?通用原則

狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒通用原則:

1, 先選擇好探針,然后設計引物使其盡可能的靠近于探針。

2, 擴增子的長度應不超過400bp,理想的*能在100-150bp內,擴增片斷約短,有效的擴增反應就越容易獲得。較短的擴增片斷也容易保證分析的一致性

3, 保持GC含量在20%和80%之間,GC富含區容易產生非特異反應,從而會導致擴增效率的降低,及在SG分析中非特異信號。

4, 為了保證效率和重復性,應避免重復的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個連續的G)

5, 將引物和探針互相進行配對檢測,以避免二聚體和發卡結構的形成。

b),探針設計指導

1,在設計引物之前設計探針

2,探針的Tm值應在68-70℃之間,如果是目測探針,則要仔細審查GC富含區。

3,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會有淬滅作用,即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在

4,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會降低反應效率,這時就應選擇配對的另一條鏈作為探針。

6, 探針應盡可能的短,不要超過30個bp。

7, 檢測探針的DNA折疊和二級結構。

人角膜上皮細胞*培養基

人視網膜色素上皮細胞*培養基

人視網膜微血管內皮細胞*培養基

人角膜成纖維細胞*培養基

人小梁網細胞*培養基

人視網膜muller細胞*培養基

人角膜內皮細胞*培養基

人脈絡膜微血管細胞*培養基

人牙周膜成纖維細胞*培養基

大鼠肺微血管內皮細胞*培養基

大鼠肺血管平滑肌細胞*培養基

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養基

大鼠氣管上皮細胞*培養基

大鼠氣管平滑肌細胞*培養基

大鼠肺成纖維細胞*培養基

大鼠支氣管上皮細胞*培養基

大鼠支氣管成纖維細胞*培養基

大鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養基

大鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養基

大鼠肺大動脈內皮細胞*培養基

大鼠肺動脈成纖維細胞*培養基

大鼠肺大靜脈內皮細胞*培養基

大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養基

大鼠胰島細胞*培養基

大鼠胰腺星狀細胞*培養基

大鼠胰腺導管上皮細胞*培養基

大鼠頜下腺上皮細胞*培養基

大鼠腮腺細胞*培養基

大鼠乳腺上皮細胞*培養基