RT-PCR試劑盒使用注意事項

　　RT-PCR試劑盒逆轉錄和PCR在同一反應體系中進行，反應過程中無需添加試劑，無需打開管蓋，在避免污染的同時提高了檢測靈敏度和實驗效率。本試劑盒包括全新高效逆轉錄酶、快速熱啟動DNA聚合酶，同時包含適用于逆轉錄和PCR擴增的反應緩沖液和實驗中所需的反應組分。經過重組表達的SuperRT逆轉錄酶RNaseH活性缺失，減少了逆轉錄反應中RNA的降解，更容易獲得全長的cDNA。

　　該逆轉酶逆轉錄效率高，可對少量RNA模板進行良好的逆轉錄反應。SuperRT逆轉錄酶與RNA親合性高，能通讀GC含量高，二級結構復雜的RNA模板，獲得高產量的cDNA。PCR反應使用的DNA聚合酶具有擴增效率高、延伸速度快的優良性能。*的緩沖體系使逆轉錄酶和聚合酶同時發揮功效。使用該試劑盒能夠方便快捷的在同一個反應管內完成逆轉錄和PCR擴增反應。使用本試劑盒擴增得到的目的產物3′端附有一個″A″堿基，可直接用于T/A克隆。

　　RT-PCR試劑盒注意事項：

　　1.用于cDNA合成反應的溶液試劑盡量可能用DEPC進行處理，并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時，首先用經過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進行過濾除菌處理。

　　2.RNA樣品要避免基因組DNA污染。

　　3.避免多次反復凍融RNA，使RNA保持在冰浴中處融化狀態。

　　4.試劑盒的各組成成分應在-20℃保存。

　　5.cDNA產物應置于-20℃保存。

　　RT-PCR試劑盒合理配備了與cDNA鏈合成反應相關的各種組分，該試劑盒中的TIANScriptM-MLV具有高效的逆轉錄酶活性，對后續的PCR或定量PCR實驗兼容性好，適合于各種PCR耐熱聚合酶。