線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測(cè)試盒操作步驟

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測(cè)試盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

 渾濁紅球菌

 香茅醇假單胞菌

 解肝磷脂土地桿菌

 紅平紅球菌

 土生拉烏爾菌（土生克雷伯菌）

 解藻弧菌（溶藻弧菌）

 洋蔥伯克霍爾德氏菌

 霍亂弧菌

 日勾維腸桿菌

 施氏假單胞菌

 表皮葡萄球菌

 拜氏梭菌

 馬鏈球菌獸疫亞種

 壞死梭桿菌壞死亞種

 泛養(yǎng)副球菌

 解淀粉芽孢桿菌

 乳酸片球菌

 戊糖片球菌

 朝鮮芽孢八疊球菌

 宋氏志賀氏菌

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)ELISA試劑盒

活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)ELISA試劑盒

紅細(xì)胞衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)ELISA試劑盒

紅細(xì)胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA試劑盒

紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)ELISA試劑盒

黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒

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含Toll白細(xì)胞介素1受體域銜接蛋白(TIRAP)ELISA試劑盒

歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒

骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原2(BST2)ELISA試劑盒